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ImageJ軟件簡介 及測量粒徑分布教程
來源:測試GO 時間:2021-01-21 17:12:10 瀏覽:30454次

1引言

圖像處理是科研中必然碰到的一環(huán)。從文章中拍攝照片的處理,到電鏡中晶格的測量,甚至逐幀分析原位視頻中數(shù)據(jù),都離不開圖像處理和信息提取。如果只簡單地通過人工來信息提取,連簡單的納米顆粒/細(xì)胞計數(shù)都讓人不勝其煩。這里介紹免費好用的ImageJ軟件用來解決幾乎與圖像處理相關(guān)的所有問題。此外,豐富的插件庫可以滿足的你對科研圖像處理的所有需求。

2軟件介紹

ImageJ是一個基于java的免費圖像處理軟件,可以應(yīng)用在Linux,MacOSX和Windows系統(tǒng)上,它是由美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)開發(fā)的。這款免費軟件被廣泛用于圖像、視頻處理,并且針對不同需求,各路大神無私分享了各種插件。只有想不到,沒有做不到。比如基本的長度、角度、面積測量,電鏡上色,平均熒光強度分析,圖像自動配準(zhǔn),圖像抖動自動校正,甚至徒手測心率。這里我對軟件進(jìn)行基本功能介紹和逐步講解大家都有可能用到的一個實例:自動獲取粒徑分布信息。

官方免費下載地址:https://imagej.nih.gov/ij/download.html

若鏈接失效,可聯(lián)系我們:17318936377(微信同號)

3界面介紹

軟件的主體非常簡約,與大多數(shù)圖像處理程序不同,ImageJ沒有主要的工作區(qū)域。ImageJ的主窗口實際上非常簡單,僅包含一個菜單欄(見圖1),其中包含所有菜單命令,工具欄,狀態(tài)欄和進(jìn)度欄。圖像,直方圖,配置文件,小部件等顯示在其他窗口中,測量結(jié)果顯示在結(jié)果表中。大多數(shù)窗口可以在屏幕上拖動并調(diào)整大小。

圖1ImageJ軟件主窗口

圖1

1)工具欄。工具欄中有各種最常用的命令,包含用于進(jìn)行選擇,繪圖,縮放和滾動等的工具。此外,工具欄的右側(cè)包含七個插槽,可以容納ImageJ網(wǎng)站上提供的60多種工具和15多種工具集可以選擇。具體命令對應(yīng)功能標(biāo)示見圖2。

圖2ImageJ軟件工具欄標(biāo)示(part-1)

圖2

2)狀態(tài)欄。當(dāng)光標(biāo)在圖像上方時,像素強度和坐標(biāo)顯示在狀態(tài)欄中。運行過濾器(filter)后,還將顯示經(jīng)過的時間和處理速率(以像素/秒為單位)。在狀態(tài)欄上單擊時,將顯示ImageJ版本,Java版本,正在使用的內(nèi)存,可用內(nèi)存和已用內(nèi)存百分比。在創(chuàng)建Selections或調(diào)整其大小時,狀態(tài)欄上會顯示選擇屬性(例如,位置,寬度等)。

3)進(jìn)度欄。狀態(tài)欄右側(cè)的進(jìn)度條會顯示操作的進(jìn)度。如果操作需要的時間少于一秒鐘,則不會出現(xiàn)。

4功能與應(yīng)用

下面我主要通過自動獲取粒徑分布信息這一具體實例,其中需要調(diào)動多種命令,可以讓大家對軟件有一個初步的了解。

1)導(dǎo)入圖片:依次選擇file->open命令,導(dǎo)入想要分析的圖片。

圖3導(dǎo)入TEM/STEM圖片

圖3

2)把RGB格式的圖片轉(zhuǎn)換為8-bit黑白圖片。依次選擇image->Type->8-bit。因為需要把RGB格式的圖片轉(zhuǎn)換為8-bit黑白圖片有助于下面步驟中設(shè)置對比度臨界值。

圖4將RGB格式的圖片轉(zhuǎn)換為8-bit黑白圖片

圖4

3)標(biāo)定比例尺。首先選擇線段工具(工具欄坐起第五個)。然后放大圖像比例尺,并在圖像中畫出比例尺長度的線段,其次選擇Analyze->SetScale來告訴系統(tǒng)線段長度所代表的真實長度。

圖5-1標(biāo)定比例尺(part1)

圖5

Knowndistance中填入真實比例尺長度,這里面是100nm,并在unitoflength里面填入單位納米(nm)。點OK。

4)選擇合適的對比度臨界值(threshold)。選擇菜單欄中Image->Adjust->Threshold(快捷鍵Ctrl+Shift+T)

圖6-1選擇合適的對比度臨界值(part1)

圖6

在下面界面中選取好合適的閾值(在這里是紅色完全覆蓋到所有的納米粒子)。這里清注意,比例尺也被紅色所覆蓋,不用擔(dān)心它也會被統(tǒng)計到粒子信息里面,后面我們會通過相應(yīng)的過濾條件去除無用信息。

5)選擇所需要統(tǒng)計的信息。這里選擇Analyze->SetMeasurements.得到相應(yīng)命令窗口。在命令窗口中勾選面積Area

圖7選擇所需要統(tǒng)計的信息

圖7

6)分析得到粒徑分布的信息。這里選擇Analyze->AnalyzeParticles.然后打開相應(yīng)的命令窗口。

圖8分析得到粒徑分布的信息(part1)

圖8

得到的命令窗口中有兩個過濾條件。第一個是面積過濾條件,假如按照默認(rèn)設(shè)置是0到Infinity的話,單個被紅色覆蓋的像素點就被識別為一個粒子,那么顯然結(jié)果是不可靠的。這里我首先目測了目測了粒子大小,然后選擇了一個不是太大的數(shù)值100nm2作為最小閾值,有利于保留有用信息的同時去除掉無用的干擾信息。第二個是圓度過濾條件,它是會首先評價粒子的圓度,然后根據(jù)人為設(shè)置的條件去除掉圓度較低的信息。為了給大家一個直觀感受,了解意義所在,我使用了默認(rèn)的圓度設(shè)置0到1,也就是說無過濾條件。在其他命令中記得要勾選Displayresults來顯示結(jié)果,勾選Excludeonedges來排除在畫面邊緣的粒子。

我們來看一下面積有過濾條件而圓度無過濾條件的結(jié)果。我們看到紅色圓圈標(biāo)記的比例尺被統(tǒng)計在內(nèi),黃色圓圈標(biāo)記的非常不規(guī)則粒子的粒子也被統(tǒng)計在內(nèi)。

圖8分析得到粒徑分布的信息(part3)

圖9

為了解決這一問題,我們把圓度調(diào)到0.2至1,請看下圖結(jié)果。比例尺便不再被統(tǒng)計在內(nèi),而且黃色框中粒子也消失。這時候我們基本可以得到滿意的信息。但是我們發(fā)現(xiàn)綠色圈中粒子仍不符合我們的要求,因為只有一個粒子,我們記下它的編號是54,以便在隨后的數(shù)據(jù)處理中刪除掉。

7)處理統(tǒng)計結(jié)果。我們可以在彈出的結(jié)果窗口中得到面積統(tǒng)計信息,見下圖。

圖9面積統(tǒng)計結(jié)果

圖10

這時全選所有數(shù)據(jù),拷貝到Excel或Origin或其他數(shù)據(jù)處理軟件中,通過圓形面積公式A=πr2得到半徑,再將半徑乘以2得到直徑d(粒徑分布是以直徑為參考)。這里記得刪除掉剛才綠色圈中的編號54。

圖10面積統(tǒng)計結(jié)果在Excel中進(jìn)行換算得到直徑

圖11

選擇所有的直徑數(shù)據(jù),做出來粒徑分布圖。我這里用Origin作圖。納米粒子粒徑分布圖到此完成。格式根據(jù)個人喜好來修改。

圖11完成的粒徑分布圖

圖12

5額外資源地址

以上是基本功能的介紹,額外需要更多自定義功能的話可以直接去下面兩個地方尋找資源:

1)帶好插件的Fiji下載(FijiisjustimageJ的縮寫)(Fiji地址:https://fiji.sc/)若鏈接失效,可聯(lián)系我們:17318936377(微信同號)


圖13

2)針對各種需求的插件下載(插件地址:https://imagej.nih.gov/ij/plugins/)若鏈接失效,可聯(lián)系我們:17318936377(微信同號)

 

圖14

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全部 3小時前 四川
文字是人類用符號記錄表達(dá)信息以傳之久遠(yuǎn)的方式和工具。現(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達(dá)的方式和思維不同。文字使人類進(jìn)入有歷史記錄的文明社會。
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