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SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳

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SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳

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項目介紹

聚丙烯酰胺凝膠電泳（Polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE），是一種常用的根據蛋白質分子量大小分離樣本中蛋白質和多肽的技術。PAGE有非變性聚丙烯酰氨凝膠電泳（Native-PAGE）和變性聚丙烯酰氨凝膠電泳（蛋白質變性劑通常為SDS）。Native-PAGE過程中蛋白質能保持完整狀態(tài)，并依據分子量大小、形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開。而SDS-PAGE僅根據蛋白質亞基分子量的不同就可以分開蛋白質。


樣品要求

1.檢測組織量要求為100mg（即黃豆大?。?；

2.細胞量要求為10^6及以上，細胞收集方式——貼壁細胞：倒掉培養(yǎng)基，pbs清洗2-3次，用細胞刮收集細胞，2000g，離心5min，然后去掉上清液，細胞沉淀干冰運輸； 懸浮細胞：2000g，離心5min，然后收集細胞沉淀，干冰運輸；

3.血液樣本：全血采用EDTA-抗凝管裝，至少1ml，4度運輸，血清或白細胞采用干冰運輸；

4.剩余樣本需要返還的項目，需要提前備注。在收到項目完整版結題報告一個月內告知公司，逾期樣本將安排清理。如果樣本特別珍貴，需提前說明。一般情況下，樣本不予返還；樣本返回需要送樣方承擔返還費用（主要是干冰費和快遞費）。

項目案例
常見問題
1、1.如何讀取SDS-PAGE結果

電泳后肉眼無法觀察到蛋白分離，需要后續(xù)的染色技術?？捡R斯亮藍染色和銀染是常規(guī)檢測和定量電泳分離蛋白質的常用方法。經過固定-染色-脫色等簡單處理后，可以清楚的觀察到蛋白質的分布。

2、2.如何儲存SDS-PAGE凝膠

通常在每次實驗之前準備新鮮的SDS-PAGE凝膠。然而凝膠也可以在4℃的清水的儲存約一周。如果凝膠染色后不能及時拍照，則需要將其放入水中，以防止凝膠干燥和收縮。建議盡快拍攝染色結果，如果凝膠長時間浸泡在水中，條帶會散開

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