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細胞培養(yǎng)

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項目介紹

細胞培養(yǎng)是將組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶)，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。常見細胞培養(yǎng)為貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)。

服務流程

交付內(nèi)容

后續(xù)實驗所需細胞數(shù)量、細胞照片以及實驗報告

樣品要求

凍存細胞株請使用干冰郵寄，詳細的細胞培養(yǎng)信息以及送樣要求，請與技術顧問溝通確認。

項目案例

常見問題

1、細胞凍存液DMSO作用

DMSO屬于一種可滲透到細胞內(nèi)的冷凍保護劑。在細胞冷凍懸液完全凝固之前，DMSO滲透到細胞內(nèi)，在細胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度，降低細胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，從而保護細胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷，同時，細胞內(nèi)水分也不會過分外滲，避免了細胞過分脫水皺縮。DMSO在常溫下對細胞的毒性作用較大，而在4°C時，其毒性作用大大減弱，且能以較快的速度滲透到細胞內(nèi)。所以，凍存時需要徹底預冷凍存液，放置在4°C需要至少30分鐘的時間。最簡便的方法是將凍存液一直放在4°C冰箱中，隨用隨取，用完放回冰箱。

2、為什么細胞長得慢

可能是細胞接種得太少，細胞密度太低?？梢韵扰囵B(yǎng)，然后消化重新鋪瓶，提高密度培養(yǎng)。

3、如何判定細胞是否發(fā)生支原體污染？

可以選用直接培養(yǎng)法、熒光染色或PCR方法檢測，比較常用的是PCR。當細胞發(fā)生支原體污染時，原則上是能夠去除支原體的，但是整個過程耗時耗力，還要考驗個人操作能力。所以如果不是處于細胞存量很少的情況下，建議發(fā)現(xiàn)污染時立刻棄掉，重新培養(yǎng)。

4、為什么會出現(xiàn)空泡

可能是鋪板時鋪得不夠均勻，局部過于密集，密集地方的細胞就開始狀態(tài)變差、空泡增多。也可能是血清差，需要更換優(yōu)質(zhì)血清，及時換液。

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