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    當(dāng)前位置:生物測試 ?  分子互作平臺 ? 

    細(xì)胞熱轉(zhuǎn)移實驗(CETSA)

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    細(xì)胞熱轉(zhuǎn)移實驗(CETSA)

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        CETSA(Cellular Thermal Shift Assay,細(xì)胞熱轉(zhuǎn)移實驗)是一種檢測細(xì)胞內(nèi)藥物與靶蛋白結(jié)合效率的實驗,其原理是靶蛋白與藥物分子結(jié)合時通常會變得穩(wěn)定。隨著溫度的升高,蛋白會發(fā)生降解;當(dāng)蛋白結(jié)合藥物后,相同溫度下,未降解蛋白的量會提高,該復(fù)合蛋白的熱熔曲線會右移。其樣品來源可以是細(xì)胞,也可以是組織,檢測方法主要有免疫印跡(Western blotting)和蛋白質(zhì)譜(MS)技術(shù)優(yōu)勢:體外靶點篩選技術(shù)進行蛋白和藥物相互作用研究需要體外純化的活性蛋白質(zhì),但是蛋白在純化過程中其構(gòu)象可能發(fā)生改變,所獲得的藥物-靶標(biāo)相互作用信息不能反映活細(xì)胞內(nèi)的真實情況。而且很多蛋白很難重組表達純化,進而限制了利用生物物理分子互作技術(shù)鑒定化合物和蛋白的相互作用。CETSA 技術(shù)可以在沒有純化的靶蛋白的情況下開展蛋白和化合物相互作用研究。


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    細(xì)胞熱轉(zhuǎn)移實驗(CETSA)

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